Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
2.6.5. ИСПЫТАНИЕ НА ПОСТОРОННИЕ ВИРУСЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КЛЕТОЧНЫХ КУЛЬТУР
Используют жидкую вакцину или восстанавливают подлежащее испытанию количество вакцины, высушенной из замороженного состояния, применяя указанную на этикетке или другую подходящую жидкость. Если это предписано в частной статье, вакцину нейтрализуют моноспецифической антисывороткой. При необходимости разбавляют таким образом, чтобы 0,1 мл смеси содержали 10 доз вакцины. 0,5 мл смеси прививают культурам, полученным из куриных почек или печени куриных эмбрионов. Культуры выделяют из групп, не содержащих указанных патогенов. Выдерживают для адсорбции в течение 1 часа при 370С. Культуры должны состоять не менее, чем из пяти повторов, и иметь общую площадь не менее 150 см2. Культуры наблюдают в течение не менее 5 дней, отмечая наличие любых специфических цитопатических эффектов, вызываемых вакциной. Если специфических эффектов не наблюдается, выполняют дополнительные испытания с клетками и жидкостями, отобранными из всех культур с интервалами не менее 5 дней, и проводят наблюдение в течение инкубационного периода, составляющего 20 дней. Конечные культуры испытывают также на наличие гемадсорбирующих агентов с использованием куриных эритроцитов. Гемадсорбирующие агенты представляют собой микроорганизмы или вирусы, вызывающие адсорбцию эритроцитов на поверхности клеточных культур, на которых происходит их репликация. Ге-мадсорбцию можно наблюдать следующим образом: в конце периода испытания к отделенным и промытым монослоям клеточной культуры добавляют 0,5% суспензии промытых эритроцитов. По окончании периода адсорбции (20 минут при 40С) монослой осторожно промывают раствором хлорида натрия в фосфатном буфере рН 7,4 R и изучают под микроскопом. При наличии гемадсорбции на монослоях клеток наблюдаются скопления эритроцитов. Результаты испытания достоверны, если не менее 80% культур выживают после каждого посева. Вакцина не выдерживает испытание, если наблюдаются любые цитопатические эффекты или обнаруживается наличие гемадсорбирующих агентов.
2.6.6. ИСПЫТАНИЕ НА ПОСТОРОННИЕ АГЕНТЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЦЫПЛЯТ.
Если в частной статье нет иных указаний, испытание проводят не менее, чем на 10 цыплятах двухнедельного возраста, отобранных из групп, не содержащих специфических патогенов. Каждому из цыплят делают прививку в количестве 100 доз внутримышечно и 10 доз путем закапывания в глаза. Через две недели прививки повторяют. Птиц наблюдают в течение пяти недель со дня первой прививки. В течение периода наблюдения птицам не вводятся антимикробные агенты.
Проводят отбор сыворотки у каждого из цыплят перед первой прививкой и в конце испытания. Каждую из сывороток исследуют соответствующим методом. Определяют наличие антител против нижеперечисленных инфекционных агентов, за исключением антител против вируса, из которого была изготовлена вакцина. Вакцина не выдерживает испытания при наличии любых доказательств присутствия посторонних агентов. Результаты испытания недостоверны при обнаружении любых антител до прививки. В таком случае испытание повторяют. Результаты испытания также недостоверны, если к его концу выживает менее 80% животных. По согласованию с компетентными органами могут применяться и другие методы испытания при условии их соответствующей специфичности и чувствительности, не меньшей по сравнению с чувствительностью нижеуказанных методов.
Инфекция
Инфекционный бронхит(1)
Инфекционный бурсит (болезнь Гумборо)
Болезнь Марека Болезнь Ньюкасла Инфекции, вызываемые Salmonella pullorum
Аденовирусные инфекции(2)
Инфекции, вызываемые вирусом птичьей энцефалопатии
Реовирусные инфекции (2)
Инфекции, вызываемые вирусом лейкоза(2)
Г рипп А(2)
Инфекционный ларинготрахе-
(и1т) (2)
(1)По согласованию с компетентными органами, при рутинных испытаниях партий продукции данное испытание может не выполняться, если для каждой партии выполнено испытание на посторонние вирусы с использованием оплодотворенных яиц (2.6.3).
(2)По согласованию с компетентными органами, при рутинных испытаниях партий продукции данное испытание может не выполняться, за исключением случаев, когда это требуется в соответствии с указаниями в частной статье.
Тип испытания
Агаровый гель - преципитин
или ингибирование гемагглютинации
Агаровый гель - преципитин
Агаровый гель - преципитин Ингибирование гемагглютинации Агглютинация
Агаровый гель - преципитин Агаровый гель - преципитин или твердофазное иммуноферментное определение (ELISA)
Агаровый гель - преципитин Нейтрализация сыворотки
Агаровый гель - преципитин Нейтрализация сыворотки
2.6.7. МИКОПЛАЗМЫ
Если испытание на микоплазмы предписано для основного или рабочего клеточного банка, для посевной партии вирусов или для контрольных клеток, применяют как метод культивирования, так и метод индикаторной клеточной культуры. Если испытание предписано для вирусного сбора, большого количества вакцины или готовой партии продукции, применяют метод культивирования. Метод индикаторной клеточной культуры может при необходимости также использоваться для контроля сред.
